Wie vermeiden Sie häufige Missverständnisse bei der Verwendung von Pipetten-Tipps mit niedrigem Bindung?

Pipettenspitzen mit niedriger Bindung kann die Probenreste aufgrund ihres hydrophoben inneren Oberflächendesigns erheblich reduzieren und sind besonders geeignet, um teure Reagenzien, viskose Flüssigkeiten oder Spurenproben (wie Proteine ​​und Nukleinsäuren) umzugehen. Wenn sie jedoch nicht ordnungsgemäß betrieben werden, können sie immer noch die Genauigkeit und Wiederholbarkeit des Experiments beeinflussen. Das Folgende ist eine Analyse häufiger Fehler und Lösungen, die in Kombination mit Laborbetriebspezifikationen verwendet werden:

Missverständnis 1: Ignorieren Sie die Vorrunde des Tipps

Falscher Operation: Aspirieren Sie direkt die Probe und lassen Sie den Schritt vor dem Rinsen weg.

Auswirkung: Obwohl niedrigbindende Pipettenspitzen Reste reduzieren können, können ihre inneren Wände für Proben wie Serum, Protein oder organische Lösungsmittel aufgrund von Oberflächenspannungen immer noch einen Mikro-Flüssigkeitsfilm bilden, was zu einem niedrigen anfänglichen Pipettierungsvolumen führt.

Richtiger Ansatz: Wiederholen Sie vor dem formalen Pipettieren die Aspirationsentscheidung 2- bis 3-mal mit derselben Probe, um eine stabile Flüssigfilmschicht an der inneren Wand der Spitze zu bilden (mit Ausnahme von Flüssigkeiten mit hohem Temperatur-/Niedertemperatur).

Missverständnis 2: Die Aspirationsgeschwindigkeit ist zu schnell oder der Winkel wird geneigt

Falscher Betrieb: Die Flüssigkeit schneiden schnell oder die Pipette ist mehr als 20 ° geneigt.
Auswirkungen:

Pipette zu schnell: Blasen oder Rückensaugung (flüssige Stürme in die Pipette und verunresste den Kolben);
Pipette geneigt: Verändert den flüssigen Oberflächendruck, was zu einem ungenauen Pipettierungsvolumen und einem erhöhten Restvolumen führt. Richtiger Ansatz:
Pipette langsam und langsam abgeben: mit konstanter Geschwindigkeit arbeiten und die Kolbenfreisetzungsgeschwindigkeit steuern;
Halten Sie vertikal gedrückt: Halten Sie den Neigungswinkel ≤ 20 °, wenn die Pipettenspitze in die flüssige Oberfläche eingetaucht ist.
Missverständnis 3: Ignorieren Sie die betrieblichen Unterschiede von viskosen Flüssigkeiten
Falscher Betrieb: Verwenden Sie die gleiche Pipettierungsgeschwindigkeit wie gewöhnliche Flüssigkeiten für Proben mit hoher Viskosität (wie Glycerin- und Zellsuspensionen).
Auswirkung: Viskose Flüssigkeiten fließen langsam an der inneren Wand der Pipettenspitze, und eine schnelle Entladung führt zu einem signifikanten Anstieg des Restvolumens, wodurch die Vorteile des niedrigen Adsorptionsdesigns ausgeglichen werden.
Richtiger Ansatz:

Verlängern Sie die Eintauchzeit: Bleiben Sie nach dem Absaugen 1 Sekunde in der flüssigen Oberfläche und halten Sie sie 1 Sekunde lang an, bevor Sie das zweite Gang drücken, um die Flüssigkeit beim Entladen zu blasen.
Wählen Sie eine Pipettenspitze mit breitem Mund: Für Makromoleküle oder Zellproben verwenden Sie eine Pipettenspitze mit weiten Mund-Mund-Mund-Niedrigadsorption (70% größer als die Standardöffnung), um die Scherkraft zu reduzieren.
Missverständnis 4: beim Installieren des Tipps hart treffen
Falscher Operation: Wiederholt auf den Pipette -Griff drücken, um die Spitze zu "festziehen".
Effekt: Langzeitaufprall trägt die Pipettenversiegelungskomponenten, zerstören die luftdichten und verursachen Leckagen oder Volumenfehler.
Richtige Methode: Setzen Sie die Pipette vertikal in die Spitze ein, drücken Sie leicht und drehen Sie leicht nach links und rechts, um sie anzupassen.

Missverständnis 5: falscher Speicher oder Wiederverwendung
Falsche Operation:

Legen Sie die Pipette flach, wenn die Spitze Restflüssigkeit enthält.
Wiederverwenden Sie Einweg-Tipps mit niedriger Adsorption, um Kosten zu sparen. Auswirkungen:
Wenn Sie flaches Flüssigkeitsrückfluss durchsetzen, korrodieren Sie die Kolbenfeder.
Die Wiederverwendung kann die Genauigkeit aufgrund von Kreuzkontaminationen oder struktureller Deformation beeinflussen. Richtige Methode:
Die Spitze sofort nach dem Pipettieren wegwerfen und die Pipette vertikal hängen;
Die Wiederverwendung ist strengstens untersagt, insbesondere wenn es um empfindliche Experimente wie PCR und Isotope geht.
Professioneller Rat: Maximieren Sie die Vorteile von Tipps mit niedriger Retention
Passen Sie die Eigenschaften von Flüssigkeiten an:
Volatile Flüssigkeiten (wie Chloroform): Vermeiden Sie die Verwendung normaler Tipps mit niedrigem Retention und verwenden Sie Lösungsmittel-sichere Spitzen oder externe Kolbenpipetten, die für flüchtige Reagenzien ausgelegt sind.
Kalibrierungsüberprüfung:
Wiegen Sie regelmäßig das Gewicht von reinem Wasser, das mit einem analytischen Gleichgewicht (1 ml = 0,9982 g bei 20 ℃) ​​abgewichen ist, um zu überprüfen, ob das tatsächliche Volumen dem Standard entspricht.
Zusammenfassung der wichtigsten Punkte: Tipps mit geringem Retention verbessern die Genauigkeit durch Reduzierung des Stichprobenverlusts. Wenn jedoch die Details der Operation ignoriert werden, ist dies möglicherweise immer noch kontraproduktiv. Standardisierte Installation, Geschwindigkeitsregelung, Anpassung an Probeneigenschaften und strenge einmalige Verwendung sind die Grundlage für die Erreichung hoher Wiederholbarkeitsexperimente.